要想流式做得好,荧光知识少不了

上一期我们讲到流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,进而讲到了荧光素的选择问题,本期让我们回过头来了解了解常见荧光素的特点。荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 激发波长为488 nm的荧光素 1. 异硫氰酸荧…

ELISA实验操作干货继续,收藏!

师弟:师姐师兄把ELISA总结的干货全公开了! 师妹:欧耶!结合上期的干货一起收藏吧。 Q:ELISA实验加完底物显色后,所有孔都无色,阳性对照也很弱,什么原因呢? Q:ELISA实验加入显色底物后,标准品有颜色,但结果分析发现标准品最高点吸光值偏低或偏高、标准曲线无梯度等等,总结如下原因: 1、标准曲线最高点吸光值偏高,超出仪器检测范围ELISA标准曲线最高点的吸光值一般在3.0以下,若太高超出…

Th细胞检测方案 - 技术要点汇总

Th检测一般操作步骤 人/小鼠/大鼠Th检测方案 人/大鼠Th1/Th2CD3/CD8/IFN-γ/IL-4小鼠Th1/Th2CD3/CD4/IFN-γ/IL-4 由上图可知,抗凝剂选择肝素钠或肝素锂,不影响Th细胞的活化和细胞因子的分泌。 非肝素抗凝血(如ETDA、枸橼酸钠抗凝血),可通过淋巴细胞分离液处理后,再进行刺激/阻断,仍然可以检测到细胞因子,如下图: