质粒提取常见问题及解决方法
质粒提取经常因操作不当引起提取的质粒不纯，或遇到各种问题，本文归纳了几个质粒提取过程中常见的问题及解决方法供大家参考。 Q1：涂布棒在酒精蘸一下，然后烧一下，能不能保证把所用的菌烧死? 小科回答：涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会，烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒干烧较长时间后，冷却后再涂。同时作多个转化时，应用几个涂布棒免得交叉污染。 Q2：原先测序鉴定没有问题…
2017-08-25
DNA实验基础知识：质粒提取
—— 导论 —— 已经提出过许多方法用于从细菌中提取纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤: ? 细菌培养物的生长。 ? 细菌的收获和裂解 ? 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)…
2017-08-11
抗体抗原实验该如何选择抗体？
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合 适的抗体， 需要考虑如下几种因素： 1. 分析或应用的类型 2. 样本蛋白的结构性质 3. 样本的种属 4. 抗体宿主的种类 5. 抗体的标记和检测 荧光素 激发波 分子量 Blue 440 Fluoresein(FITC) 495 390 Green 528 Rhodamine(TRITC) 550 444 Red 620 …
2017-06-29
如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞？
1）分离外周血中的单个核细胞（PBMC） 1．抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是PBMC，淋巴细胞分离液层和最下面的红细胞层之间是粒细胞层，又成为棕黃层。 2．吸去最上层的血浆，收集血…
2017-06-01
细胞凋亡 - 流式检测方法大全
https://www.liankebio.com/article-information_Tech-1309.html 作者：eBioscience官网 发布日期：2016-12-30 10:00 细胞凋亡（apoptosis）指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不…
2016-12-30
ELISA试剂盒实验前都要做哪些准备？
成功总是青睐有准备的人，ELISA试剂盒检测是否能完美的完成，需要提前做好准备，具体应该做哪些准备呢？ 1. 仔细阅读说明书，确定试剂盒在有效期内。 2. 按说明书确定所有试剂是否齐全，完整的Sunny ELISA试剂盒包含预包被酶标板，检测抗体、链霉亲合素标记的HRP、标准品、标准品稀释液、TMB显色液、终止液、洗液等10个组分。另外要确认试剂盒以外的材料是否齐全，如酶标仪、移液器及枪头、加样槽…
2016-08-09
