ELISA系列 | 血管内皮生长因子（VEGF）
血管内皮生长因子是什么？ 血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），又称血管通透因子（vascular permeability factor，VPF）是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，广泛分布于人和动物的心、脑、肾、骨骼、皮肤等组织器官，能够增强微静脉及小静脉的通透性，促进新生血管的形成及血管内皮细胞的生长，是目前促进血管生成专属…
2023-08-08
ELISA通关必备丨数据篇丨标准曲线不佳
ELISA实验加入显色底物后，标准品有颜色，但结果分析发现标准品最高点吸光值偏低或偏高、标准曲线无梯度等等，总结如下原因： 一、标准曲线最高点吸光值偏高，超出仪器检测范围 ELISA标准曲线最高点的吸光值一般在3.0以下，若太高超出仪器检测范围，显示OVER FLOW，可能原因： 序号 可能原因 解决方法 1 如OD绝对值靠谱，则显色过度 TMB显色体系中建议根据S1，S2颜色进行判断， 当S1，…
2023-01-17
ELISA通关必备丨操作篇丨常见问题及解决方案
一、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作？ 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应，实验前务必将所有试剂平衡至室温，包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 二、如何获得良好线性的标准曲线？ 按照推荐方式保存标准品；溶解标准品之前需短暂离心，彻底收集粉末；确保标准品完全溶解和混匀（大约10min），然后再进行后续的…
2022-12-06
ELISA通关必备丨操作篇丨溶解与稀释标准品
ELISA标准曲线是结果计算的尺子，标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢？ 粉末标准品短暂离心，让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水，加水后轻柔涡旋震荡，室温静置溶解 10-30min，让粉末完全溶解。注意：加水后暂不用移液枪吹吸，避免蛋白未溶解，枪头带出部分蛋白，待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。 标准品梯度稀释： 标准品稀释液…
2022-10-10
ELISA通关必备丨样本篇丨不常见样本
利用ELISA（酶联免疫吸附测定）进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对几种不常见样本处理方法整理，希望对您有所帮助。 唾液 在唾液样本采集之前，受试者被建议不要吃东西、抽烟或喝饮料。用盐水彻底漱口后，采集唾液3 …
2022-09-14
ELISA通关必备丨样本篇丨常见样本丨细胞
利用ELISA（酶联免疫吸附测定）进行检测的样本类型包括常见的血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等，这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对常见细胞样本处理方法整理，希望对您有所帮助。 细胞样本根据目的物所在部位可选择细胞裂解液或细胞培养上清作为样本。 需要注意的是： 因该类样本干…
2022-08-16
ELISA通关必备丨如何选择试剂盒
小伙伴们为ELISA实验选购试剂盒时，是不是有很多问号?选什么物种？什么指标？什么检测限？怎样的精密度，稀释线性，特异性是优秀的？ 小科整理了ELISA产品相关要素，助您五分钟掌握如何选到适合自己实验的试剂盒。 ELISA产品选择要素 根据实验物种及待检样品性质来选择种属：人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等；样本类型：血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。 根据样品中检测物水平选择宽动力学检测范围…
2022-06-29
ELISA通关必备丨基础知识
ELISAEnzyme-Linked Immuno Sorbent Assay 酶联免疫吸附检测，利用抗原抗体的特异性反应，对样本中可溶性目的产物进行定量检测。 ELISA 与常规免疫实验对比 ELISA样本制备简单；灵敏度高（pg/ml）；特异性强；重复性好；操作简单；检测仪器易获得。 Western BlotIHC/IFELISA 定性定性定性 半定量半定量定量 半定位定位非定位 灵敏度中灵敏…
2022-06-27
