叮!联科向您投递了个ELISA实验操作干货包,请查收~
包裹一 样本如何处理、收集、保存? 1.细胞培养上清 细胞培养液在2500rpm/min 离心20分钟后,收集上清即刻检测, 或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 2.血清样本 分离管分离血清。在1000g离心之前,使血样凝集30分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 3. 血浆样本 EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集3分钟内离心收集样本。即刻检…
包裹一 样本如何处理、收集、保存? 1.细胞培养上清 细胞培养液在2500rpm/min 离心20分钟后,收集上清即刻检测, 或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 2.血清样本 分离管分离血清。在1000g离心之前,使血样凝集30分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 3. 血浆样本 EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集3分钟内离心收集样本。即刻检…
CD34是一种高度糖基化的细胞表面抗原,优先并广泛地表达于人类及其他哺乳动物造血干/祖细胞表面,属于唾液粘蛋白家族。CD34也标记多种组织的常驻祖细胞,包括血液、基质/纤维/脂肪细胞祖细胞(FAPs)、骨骼肌、皮肤(角化细胞)、内皮和真皮上皮等。此外,CD34在成熟的血管内皮细胞上也广泛表达。
通常所说的Th17是指在各种生理与病理条件下有能力分化为Th17的辅助性T细胞 (严格意义上是Th0)。当受到外界因素(如刺激素、病原体等)刺激,Th0即会向Th1、Th2、Th17等Th细胞分化,此时,通过检测分泌的细胞因子(如IFN-γ、IL-4、IL-17等)实现对各类Th细胞的检测。 Th17:主要分泌IL-17、IL-22等促炎因子,介导自身免疫性疾病和炎症反应。 考虑到静息…
单细胞悬液制备 1. 细胞 材料: 消化酶、流式染色缓冲液(推荐目录号70-S1001)、流式管 操作过程: 悬浮细胞:离心收集细胞,去除上清,用流式染色缓冲液重悬细胞,达到细胞终浓度为2x105-106/mL。 贴壁细胞:用合适的酶消化细胞,(推荐)加入含血清的PBS或者含血清的细胞培养基终止蛋白酶反应,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,防止酶破坏细胞抗原表位,推荐Accutase酶消化细胞…
流式细胞术的应用颇为广泛,利用两种检测信号可实现对细胞大小、颗粒度及内部结构(如细胞器)、细胞状态(凋亡/周期)、细胞内离子(Ca2+、pH、ROS)、细胞表型等的检测分析。
流式细胞术(flow cytometry, FCM)是当代最先进的细胞分析技术之一,包括各种细胞的计数、细胞中抗原分子的检测、细胞中DNA和RNA的倍体分析、细胞的生物学特性及功能分析等。在血液学检测中,应用FCM分析的样本多为外周血、骨髓、各类体液(如脑脊液、胸水、腹水)以及人体的组织(如淋巴结、脾、肝等),下面我们将介绍这几种常见样本的制备方法,样本制备的好坏对最终的检测结果有很大影响。 外周…
大鼠肝脏匀浆 方法一 提取缓冲液:PBS,pH 7.2,0.05%叠氮钠、0.5%Triton X-100,和蛋白酶抑制剂混合物 步骤:脂多糖(10 mg/mL生理盐水),按15毫克/千克静脉注射以处死老鼠。杀死后,迅速切除肝脏,冲洗血液,在预冷提取缓冲液中研磨。然后超声处理10分钟。匀浆在12000 x g下离心10分钟。取上清备用。 参考文献:Reference: Borovikova, L.…