开学大促!!固定破膜剂买一送一

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说起流式细胞术
有一种应用叫做细胞免疫分型分析
表面抗原or胞内/核内抗原
检测胞内/核内抗原时,破膜是必不可少的一环

为 何 要 破 膜 ?

正常情况下,荧光标记的抗体无法通过完整的细胞膜进入细胞内,因而无法检测胞内抗原。破膜,就是利用破膜剂破坏细胞膜的完整性,给细胞膜打上足够大的孔,使抗体可以进入细胞内,进而特异性结合目的蛋白。

何 为 破 膜 剂 ?

通常所说的破膜剂包括固定剂(如多聚甲醛,固定细胞膜)和去污剂(如皂素、Tween-20和Triton-x等,给细胞膜打孔)。相对于Tween-20和Triton-x,皂素的破膜会更温和一些,破膜过程是可逆的,能保证膜表面抗原的完整性,但不可破核膜。

破 膜 剂 应 用 — 胞 内 抗 体 染 色

1. 制备好细胞悬液,取100 μl(全血样本:人100 μl,小鼠30~50 μl)染表面抗体,室温避光孵育15 min,不用洗涤;

2. 加入100 μl FIX&PERM MEDIUM A固定剂,室温孵育15 min;

3. 加入3 ml流式染色缓冲液,300 g离心5 min,弃上清,涡旋振荡,使残留液体混匀沉淀;

4. 加入100 μl FIX&PERM MEDIUM B破膜剂和胞内抗体(和/或相应的同型对照),室温避光孵育15 min;

5. 加入3 ml流式染色缓冲液,300 g离心5 min,弃上清收集细胞;

6. 用500 μl 流式染色缓冲液重悬细胞,上机检测并分析。

注意:如不能立即检测,用0.5 ml 0.1%~4%多聚甲醛重悬,4℃避光保存,24 h内上机分析。

[ 破 膜 剂 开 学 大 礼 包 ]

要想胞内染色做得好,选对破膜剂很关键。针对9月开学季,联科生物为广大科研用户提供破膜剂开学大礼包。活动期间(2020.09.01-2020.10.31),凡购买联科生物破膜剂(目录号GAS/2系列)促销产品,即可享受目录价买1送1特惠。促销产品目录如下:

目录号 产品名称 规格 目录价
GAS003/2 Fix & Perm Kit 固定破膜剂 50T 560
GAS005/2 Fix & Perm Kit固定破膜剂 100T 1060
GAS006/2 Fix & Perm Kit固定破膜剂 200T 1960

备注:破膜剂包含A液和B液两种组分,可将细胞固定、减少对表面抗原的影响,并增加细胞膜的通透性,使荧光素标记的抗体可通过细胞膜与抗原结合。同时B液还可高效裂解红细胞,无需另外处理,减少对细胞的影响。