常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化

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作者:QIAGEN官网 发布日期:2015-02-21 06:00

QIAamp DNA Kits —— 纯化基因组 DNA、线粒体 DNA、细菌、寄生虫或病毒 DNA
1.20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)

2.多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织

3.完全去除污染物和抑制剂

4.可在 QIAcube 上进行自动化纯化

表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量

样品 用量 总核酸的量(µg)* DNA 的量(µg)†
血液 200 µl 4–12 4–12
白膜层 200 µl 25–50 25–50
细胞 106 20–30 15–20
肝脏 25 mg 60–115 10–30
大脑 25 mg 35–60 15–30
25 mg 25–45 5–10
心脏 25 mg 15–40 5–10
肾脏 25 mg 40–85 15–30
脾脏 10 mg 25–45 5–30

* 核酸未经RNase处理 。

† 核酸经RNase处理。总核酸的量(µg)*

图1 纯化长达50 kb的基因组DNA

QIAamp Kits从图示来源的样本(每泳道3 µg)中纯化获得的DNA长度

RNeasy Kit —— 常规组织或细胞 RNA 纯化

1.从细胞、组织或酵母中纯化至总 RNA

2.数分钟内快速纯化得到高品质总 RNA

3.即用型 RNA 在各种下游应用中表现良好

4.无需有机试剂或乙醇沉淀步骤

RNeasy Kits 提供四种规格(Micro, Mini, Midi, Maxi),RNeasy 离心柱的结合能力分别为45 μg, 100 μg, 1 mg 和 6 mg 的 RNA。

表2 RNeasy Mini Kit从各类样本中纯化得到的总RNA产量

样本来源 起始材料 平均产量(µg)
动物细胞LMHHeLaCOS-7淋巴细胞(未受激) 1 x 1061 x 1061 x 1061 x 106 1215350.5
小鼠组织肝肺脾 10 mg10 mg10 mg 401035
真菌细胞S. cerevisiae 1 x 107 25
使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的甲醛琼脂糖凝胶电泳和northern印迹。从各种来源的样本中分离总RNA(10 µg)上样至各泳道。所有组织均来源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P标记的探针识别的(G)GAPDH;(E)翻译延长因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国蒂宾根马克斯-普朗克生物学研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探针检测。M:0.24–9.5 kb RNA分子量标准。胚胎、Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb条带(图示)为核前体RNA。 图2 从多种样本中纯化高品质RNA

表3 常规组织,细胞核酸纯化产品列表:

产品名称 货号
QIAamp DNA Mini Kit (50) Y5-51304
QIAamp DSP DNA Mini Kit (50) Y5-61304
RNeasy Mini Kit (50) Y5-74104
RNeasy Mini Kit (250) Y5-74106
RNeasy Plus Mini Kit (50) Y5-74134
RNeasy Plus Universal Midi Kit (10) Y5-73442
RNeasy Midi Kit (10) Y5-75142
RNeasy Midi Kit (50) Y5-75144
RNeasy Maxi Kit (12) Y5-75162