常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化

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作者:QIAGEN官网 发布日期:2015-02-21 06:00

QIAamp DNA Kits —— 纯化基因组 DNA、线粒体 DNA、细菌、寄生虫或病毒 DNA
1.20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)

2.多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织

3.完全去除污染物和抑制剂

4.可在 QIAcube 上进行自动化纯化

表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量

样品 用量 总核酸的量(µg)* DNA 的量(µg)†
血液 200 µl 4–12 4–12
白膜层 200 µl 25–50 25–50
细胞 106 20–30 15–20
肝脏 25 mg 60–115 10–30
大脑 25 mg 35–60 15–30
肺 25 mg 25–45 5–10
心脏 25 mg 15–40 5–10
肾脏 25 mg 40–85 15–30
脾脏 10 mg 25–45 5–30

* 核酸未经RNase处理 。

† 核酸经RNase处理。总核酸的量(µg)*

图1 纯化长达50 kb的基因组DNA

QIAamp Kits从图示来源的样本(每泳道3 µg)中纯化获得的DNA长度

RNeasy Kit —— 常规组织或细胞 RNA 纯化

1.从细胞、组织或酵母中纯化至总 RNA

2.数分钟内快速纯化得到高品质总 RNA

3.即用型 RNA 在各种下游应用中表现良好

4.无需有机试剂或乙醇沉淀步骤

RNeasy Kits 提供四种规格(Micro, Mini, Midi, Maxi),RNeasy 离心柱的结合能力分别为45 μg, 100 μg, 1 mg 和 6 mg 的 RNA。

表2 RNeasy Mini Kit从各类样本中纯化得到的总RNA产量

样本来源 起始材料 平均产量(µg)
动物细胞LMHHeLaCOS-7淋巴细胞(未受激) 1 x 1061 x 1061 x 1061 x 106 1215350.5
小鼠组织肝肺脾 10 mg10 mg10 mg 401035
真菌细胞S. cerevisiae 1 x 107 25
使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的甲醛琼脂糖凝胶电泳和northern印迹。从各种来源的样本中分离总RNA(10 µg)上样至各泳道。所有组织均来源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P标记的探针识别的(G)GAPDH;(E)翻译延长因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国蒂宾根马克斯-普朗克生物学研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探针检测。M:0.24–9.5 kb RNA分子量标准。胚胎、Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb条带(图示)为核前体RNA。 图2 从多种样本中纯化高品质RNA

表3 常规组织,细胞核酸纯化产品列表:

产品名称 货号
QIAamp DNA Mini Kit (50) Y5-51304
QIAamp DSP DNA Mini Kit (50) Y5-61304
RNeasy Mini Kit (50) Y5-74104
RNeasy Mini Kit (250) Y5-74106
RNeasy Plus Mini Kit (50) Y5-74134
RNeasy Plus Universal Midi Kit (10) Y5-73442
RNeasy Midi Kit (10) Y5-75142
RNeasy Midi Kit (50) Y5-75144
RNeasy Maxi Kit (12) Y5-75162