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ELISA通关必备

作者:小科    发布日期:2021-09-24 09:00


ELISA 基 础 知 识


● ELISA = Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay :

酶联免疫吸附检测,利用抗原抗体的特异性反应,对样本中可溶性目的产物进行定量检测
 


● ELISA 与常规免疫实验对比:

ELISA样本制备简单;灵敏度高(pg/ml);特异性强;重复性好;操作简单;检测仪器易获得(酶标仪)。
 


 

● ELISA 种类


● 各种 ELISA 特点
 


● ELISA 应用场景
 

 

 

八 大 质 控 指 标


不是所有的ELISA试剂盒开发都如此严格!
 


联科生物每个指标的ELISA试剂盒都进行了8大指标的质控。6项专利。ISO9001质量管理体系。值得您信赖!

 

ELISA 实 验 步 骤



● ELISA简要步骤(双抗体夹心法)
 

 

 

 

ELISA 操 作 注 意 事 项


 

 

 



标 准 曲 线 拟 合


标准品浓度和相应的吸光度(OD)值如果能够呈现直线关系是最理想的,这时可以通过Excel等方便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。但我们做免疫检测很少能够有这么理想的情况,标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。


关于标准曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只适用于曲线的一部分。Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。在一个长的区间内,Logistic应该都能拟合得较为理想。用来定量,S形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两端的平坦部分计算误差会大,有时甚至会很大。


所以关键在于你检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓度部分可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部分可以用直线方程,中间部分可用对数方程,而中后段可用四参数。


目前国际上流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合",用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而获得比较正确的样品中待测物质的浓度值。

 

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