罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒

Post published:2015-02-28
Post category:生物资讯
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作者：Roche官网发布日期：2015-02-28 11:00

High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。

图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp ,使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um FFPET样品中抽提总RNA。绿色线显示了使用该方法抽提获得的RNA长片段极少，以RNA降解片段为主。灰色线显示的RNA抽提物覆盖的片段范围较广，但在短片段RNA的分布存在较大的偏倚性。
结果：罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit的抽提产物（蓝色线）较均匀地覆盖了整个片段分布范围。

图2：从近期和长期保存的FFPET样品中均可抽提获得高RNA得率A）柱形图显示了从结肠癌组织和正常结缔组织10um FFPET切片样本中抽提获得的RNA平均得率（n=24）样本保存时间分别为＜6个月和＞5年。结果：罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit能获得更高得率的RNA抽提产物。B）显示了图A的最左侧两列柱状图，其24个重复样本各自的RNA得率。24个重复样本来自于组织的连续切片，以避免来自不同组织区域的核酸含量差异。结果：在常规研究中，同一组织样本的不同FFPET切片的核酸得率存在差异。但对于同一种样本，罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit始终能获得更高得率的RNA抽提产物。

图3：从样品中抽提获得高质量的RNA，提高RT-aPCR检测灵敏度。作为qPCR实验中的核酸模板，要求高质量的RNA，即良好的核酸得率、纯度和片段大小分布，并能高灵敏度和不偏倚地检测模板基因的表达情况。从3中不同异种移植物切片组织中抽提RNA，取150ng总RNA，使用Transcriptor Universal cDNA Master进行反转录反应，取10ng cDNA产物通过LightCycler 480 Real-Time PCR Instrument扩增检测ALAST基因表达情况。