我们不仅有流式千聊,还有ELISA问题分享

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作者:联科生物 发布日期:2019-10-28 09:00

昨晚的流式千聊活动获得了圆满的成功,学习交流群里的各位小伙伴也是讨论的热火朝天。其实,我们不仅有流式千聊,还有ELISA常见问题分享

今天,我们一起看看ELISA实验样本相关常见问题。

Q1. 血清/血浆样本出现溶血现象,还能做ELISA检测吗?

A1. 若样本溶血不严重(浅红色),仍可做ELISA检测,建议适当增加洗板次数,减少背景过高影响;若溶血严重(深红色),建议重新取样。

Q2. 样本冻融对ELISA检测有何影响?

A2. 样本反复冻融易引起目标蛋白降解,影响ELISA检测结果,建议避免样本反复冻融。一般来说,血清/血浆样本(蛋白含量丰富)冻融 1-2 次,影响不大;其他样本类型,如细胞上清/肺泡灌洗液,冻融 1-2 次后,蛋白降解严重,不适合再用于 ELISA 检测。

Q3. 血清样本检测时,能否直接原液上样?

A3. 因为血清样本非常复杂,稀释可以降低其中的干扰物质(大分子蛋白)影响,获得的结果比较准确。通常不建议原液上样,若坚持原液,建议做一个原液和稀释2倍的对比实验。

Q4. 样本如何处理、收集、保存?

A4. 细胞培养上清:细胞培养液在2500rpm/min 离心20分钟后,收集上清即刻检测, 或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

血清样本:分离管分离血清。在 1000 g 离心之前,使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

血浆样本:EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集 30分钟内离心收集样本。即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。

不知各位小伙伴们在日常ELISA检测实验中还遇到哪些问题与疑惑呢,欢迎留言,一起交流学习。