流式实验中同型对照的选择方法

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作者:联科生物 发布日期:2017-04-13 09:00

抗体有时会因为非特异的蛋白-蛋白相互作用结合细胞内成分,因为疏水作用结合脂肪,也可能会结合一些细胞表面的抗体受体。比如说,IgG亚型的抗体会结合细胞表面的Fc受体,如CD16、CD32和CD64等。理想条件下,各种类型的非特异性结合都可以通过蛋白(BSA、牛奶或动物血清)来阻断。Fc受体的结合则可以通过与含免疫球蛋白的血清预孵育来阻断。所以一个抗体非特异性相互作用及与Fc受体结合的情况,都可以用无关抗原的相同亚型抗体来比照,即同型对照。那么如何选择同型对照呢?

1、 一般选择与一抗的成分完全相同种属来源、相同亚型和亚链、相同荧光标记的抗体。比如抗人的CD56 FITC标记的抗体,成份是MouseIgG1,κ,那么它的同型对照应该是FITC标记的MouseIgG1,κ。

2、如果抗体是组合形式,如纯化的一抗+荧光标记的二抗,那么应该选择一抗的同型对照。比如CD86的纯化抗体,成分是Mouse IgG1,κ,它的同型对照是纯化的Mouse IgG1,κ,它的二抗PE标记的抗小鼠IgG1。那么染色方式如下:样本管:纯化的CD86+PE标记的抗小鼠IgG1(二抗)+样本,同型对照管:纯化的同型对照+PE标记的抗小鼠IgG1(二抗 )+样本。

3、如果没有找到完全匹配的同型对照,在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下,优先选择的顺序应该是亚链不同--亚型不同。比如,某种的抗体的来源是Mouse IgG2а,κ。如果找不到完全相同的同型对照,那么优先选择相同荧光标记Mouse IgG2а;如果也没有找到Mouse IgG2а,那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b;如果最后还是没有找到Mouse IgG2b,那么选择相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照。

以下是联科生物同型对照抗体列表,供选择。

货号 产品名称 规格 目录价
CH101 Hamster IgG Isotype Control,FITC 20T 400
CH104 Hamster IgG Isotype Control,PE 20T 400
CM101 Mouse IgG1 Isotype Control,FITC 20T 360
CM104 Mouse IgG1 Isotype Control,PE 20T 360
CM105 Mouse IgG1 Isotype Control,APC 20T 400
CM106 Mouse IgG1 Isotype Control,PE-Cy5 20T 400
CM118 Mouse IgG1 Isotype Control,PE-Cy5.5 20T 450
CM120 Mouse IgG1 Isotype Control,Alexa Fluor? 488 20T 450
CM2a01 Mouse IgG2a Isotype Control,FITC 20T 360
CM2a04 Mouse IgG2a Isotype Control,PE 20T 360
CM2a05 Mouse IgG2a Isotype Control,APC 20T 400
CM2a06 Mouse IgG2a Isotype Control,PE-Cy5 20T 400
CM2b01 Mouse IgG2b Isotype Control,FITC 20T 360
CM2b04 Mouse IgG2b Isotype Control,PE 20T 360
CM2b05 Mouse IgG2b Isotype Control,APC 20T 400
CM2b06 Mouse IgG2b Isotype Control,PE-Cy5 20T 400
CR101 Rat IgG1 Isotype Control,FITC 20T 360
CR104 Rat IgG1 Isotype Control,PE 20T 360
CR105 Rat IgG1 Isotype Control,APC 20T 400
CR106 Rat IgG1 Isotype Control,PE-Cy5 20T 400
CR2a01 Rat IgG2a Isotype Control,FITC 20T 360
CR2a04 Rat IgG2a Isotype Control,PE 20T 360
CR2a05 Rat IgG2a Isotype Control,APC 20T 400
CR2a06 Rat IgG2a Isotype Control,PE-Cy5 20T 400
CR2b01 Rat IgG2b Isotype Control,FITC 20T 360
CR2b04 Rat IgG2b Isotype Control,PE 20T 360
CR2b05 Rat IgG2b Isotype Control,APC 20T 400
CR2b06 Rat IgG2b Isotype Control,PE-Cy5 20T 400

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