流式细胞术知识分享 一 仪器篇

流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源,照射在细胞上,产生散射光和荧光信号,由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。本文将为大家简单介绍几种流式细胞仪。

实验时间 | 流式实验胞外/核内步骤小结

单细胞悬液制备 1. 细胞 材料: 消化酶、流式染色缓冲液(推荐目录号70-S1001)、流式管 操作过程: 悬浮细胞:离心收集细胞,去除上清,用流式染色缓冲液重悬细胞,达到细胞终浓度为2x105-106/mL。 贴壁细胞:用合适的酶消化细胞,(推荐)加入含血清的PBS或者含血清的细胞培养基终止蛋白酶反应,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,防止酶破坏细胞抗原表位,推荐Accutase酶消化细胞…

干货分享|流式细胞术常见样本的制备与保存

流式细胞术(flow cytometry, FCM)是当代最先进的细胞分析技术之一,包括各种细胞的计数、细胞中抗原分子的检测、细胞中DNA和RNA的倍体分析、细胞的生物学特性及功能分析等。在血液学检测中,应用FCM分析的样本多为外周血、骨髓、各类体液(如脑脊液、胸水、腹水)以及人体的组织(如淋巴结、脾、肝等),下面我们将介绍这几种常见样本的制备方法,样本制备的好坏对最终的检测结果有很大影响。 外周…

【视频】Treg检测操作演示

调节性 T 细胞(Tregs),曾被称为抑制性 T 细胞,是 T 细胞的亚群,可调节免疫系统、维持对自身抗原的耐受、抑制自身免疫疾病。Tregs 具有免疫抑制性,可抑制或下调效应 T 细胞的诱导和增殖。调节性 T 细胞有多种类型,其中研究最深的一类表达 CD4、CD25 和 FOXP3(CD4+CD25+调节性 T 细胞)。

要想流式做得好,荧光知识少不了

上一期我们讲到流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,进而讲到了荧光素的选择问题,本期让我们回过头来了解了解常见荧光素的特点。荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 激发波长为488 nm的荧光素 1. 异硫氰酸荧…