裂红法vs密度梯度离心法

进行流式实验时,样本处理至关重要,不当的样本处理会导致实验结果的失败。今天,小科来聊聊血液样本在流式实验中的处理方法。 血液样本是天然的单细胞悬液,包含红细胞、白细胞和血小板等多种成分。其中白细胞细分为有粒白细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和无粒白细胞(单核细胞和淋巴细胞),是机体免疫系统的关键组成部分。 目前血液样本常见的两种处理方法:一种是裂红法另一种是离心法,该如何选择呢?小科…

流式实验图有点难吗~小科教你轻松看懂!

目前常见流式图有一维直方图、二维散点图、等高线图、密度图等多种,小科这里主要对常见的流式图类型以及常见问题进行介绍。 01单参数直方图 每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布,以直方图的方式来显示。在直方图中,横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值,可以是线形或者对数,纵坐标一般是细胞数。利用直方图来设门分析,可得到细胞数目、门内细胞百分比等统计参量,总的来说单参数直方图只能表示具有同一…

流式非特异性荧光的照妖镜-同型对照

什么是同型对照 同型对照是指与检测抗体相同种属来源、相同亚型、相同荧光标记,但对目标靶点没有特异性结合的抗体。它能让非特异性荧光现原形,从而得到真正的阳性目的细胞群。 同型对照的作用 衡量抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色情况。 为何需要同型对照 我们都知道抗体是由Fab和Fc构成的(Y字型),其中Fab端是可变区域,能与抗原特异性结合,而Fc端是恒定的,它可以和我们表达Fc受体的细胞非特异结…

干货分享 | 要想流式图好看,细胞前处理你得好好搞

在流式检测实验中,除了血液样本,几乎所有的样本均为实体组织,如脾脏、肝脏、肾脏、脂肪、肿瘤等,那么为了做好流式的检测,我们首先得将实体组织消化成为活性较佳的单细胞悬液。 那么怎样得到活性较佳的单细胞悬液呢?今天小科为大家带来客户咨询最多的实体组织的单细胞悬液提取,以小鼠脾脏、小鼠肿瘤组织的提取为例,感兴趣的话就跟小科一起往下学习吧。 一、小鼠脾脏单细胞悬液制备 脾脏是体内最大的免疫器官,含有大量的…

论文分享 | 流式细胞术神助攻癌症免疫治疗研究新进展

本文基于前期开发多种肿瘤微环境响应递药系统的研究基础上,创新性研制了一种包载转化生长因子-β受体1(TGF-β 1)的抑制剂和溴结构域蛋白4(BRD4)的抑制剂的多功能纳米囊泡,靶向研究免疫排斥性肿瘤(immune-excluded tumors,IETs),获得了突破性的治疗进展。 IETs由于固有和获得性免疫抵抗,对目前的免疫治疗反应有限。特别是胰腺癌和三阴性乳腺癌等IETs,具有免疫原性低、…

干货分享 | 辅助试剂助力流式检测更高效、稳定完成

在流式检测实验中,由于实验性质、检测指标的不同,需要相应的流式辅助试剂来对整个检测进行辅助,才能达到预期的实验结果。辅助试剂也许并不那么起眼,但不可或缺。 杭州联科依据不同的实验需求,专业研发流式染色缓冲液、细胞固定液、细胞破膜剂、细胞刺激剂、细胞阻断剂、FcR抗体、红细胞裂解液、淋巴细胞分离液等一系列辅助试剂,应有尽有,助您流式实验尽在掌握。 01 流式染色缓冲液 流式是一项活细胞检测的技术,一…

基础提炼 | 手牵手,好朋友,流式路上共前进

流式细胞术是一种基于检测设备-流式细胞仪,对悬浮的单个活细胞或颗粒进行快速、多参数检测分析的一项生物学前沿技术。自20世纪60年代后期发展起来后,已在生物医学领域得到了广泛的应用,免疫相关的科研实验室流式检测已成为不可或缺的研究手段,而临床的流式则成为了自基因诊断技术以来又一崭新的高技术检测方法。 那么为了得到一个真实可靠、准确灵敏的实验结果,都有哪些必然的要素呢?我们把这些影响最大的因素归纳为流…