细胞周期检测-知识点汇总
细胞周期检测是很常见的一种流式检测类型。流式细胞术通过DNA染料(如PI)分析细胞周期,需加入RNase去除RNA影响。检测时不应洗涤,以免染料丢失。固定细胞和活细胞的检测方法不同,固定细胞需用乙醇处理,而活细胞检测可使用特定试剂盒。更多周期检测信息,实验步骤视频...
细胞周期检测是很常见的一种流式检测类型。流式细胞术通过DNA染料(如PI)分析细胞周期,需加入RNase去除RNA影响。检测时不应洗涤,以免染料丢失。固定细胞和活细胞的检测方法不同,固定细胞需用乙醇处理,而活细胞检测可使用特定试剂盒。更多周期检测信息,实验步骤视频...
Th检测一般操作步骤 人/小鼠/大鼠Th检测方案 人/大鼠Th1/Th2CD3/CD8/IFN-γ/IL-4小鼠Th1/Th2CD3/CD4/IFN-γ/IL-4 由上图可知,抗凝剂选择肝素钠或肝素锂,不影响Th细胞的活化和细胞因子的分泌。 非肝素抗凝血(如ETDA、枸橼酸钠抗凝血),可通过淋巴细胞分离液处理后,再进行刺激/阻断,仍然可以检测到细胞因子,如下图:
检测原理 小鼠Th1/Th2细胞与人的相似,均可分泌多种细胞因子: Th1 细胞主要分泌 IL-2、IL-12、IFN-γ和 TNF-β/α等 Th2 细胞主要分泌 IL-4、IL-5、IL-6 和 IL-10 与人相同,鉴别 Th1/Th2同样采用下面的组合: Th1:CD4+IFN-γ+, Th2:CD4+IL-4+ 刺激素也是我们通常选用的为PMA(佛波酯)+ Ionomycin(离子霉素)…
制备 PBMC,并调整细胞浓度至 107/mL。 在每个流式上样管中加入 100 μL 准备好的细胞悬液,细胞数约为 1 × 106 个。 按照细胞表面抗原染色方法标记 CD4 和 CD25。根据说明书和抗体管上的标识确定抗体用量(一般来说是 20μL,可能随批次有差异)。按个人要求设置空白管、对照管、补偿管和样本管。4℃ 孵育 30 分钟。 用预冷 PBS 溶液洗涤细胞,300-400 g 离心…
细胞凋亡和坏死是两种不同的细胞死亡方式,科学家们通过形态和分子变化来区分它们。常见的凋亡检测方法包括光学显微镜、荧光显微镜观察,Annexin V法检测磷脂外翻,检测线粒体膜电位变化,DNA片断化分析等。TUNEL法和Caspase-3活性检测也非常重要,能帮助科学家深入了解细胞凋亡的过程。