干货分享 | 辅助试剂助力流式检测更高效、稳定完成

在流式检测实验中,由于实验性质、检测指标的不同,需要相应的流式辅助试剂来对整个检测进行辅助,才能达到预期的实验结果。辅助试剂也许并不那么起眼,但不可或缺。

杭州联科依据不同的实验需求,专业研发流式染色缓冲液、细胞固定液、细胞破膜剂、细胞刺激剂、细胞阻断剂、FcR抗体、红细胞裂解液、淋巴细胞分离液等一系列辅助试剂,应有尽有,助您流式实验尽在掌握。

01 流式染色缓冲液

流式是一项活细胞检测的技术,一定程度上细胞的活性如何决定了实验的成败,细胞培养中,常规的培养基能够保证细胞活性最佳,但常规培养基中会有大量的干扰信号影响检测的效果哦。而专业的流式染色缓冲液就非常适用于单细胞的流式检测,既能保证细胞的活性又含可以最大程度的减少抗体非特异性结合的FBS/BSA成分。

联科可以为大家提供专业的流式染色缓冲液—FCM staining buffer使用方便,价格便宜,能有效降低非特异性结合,适用于各种流式细胞术实验。

流式染色缓冲液产品

货号

名称 规格
S1001 Flow cytometry Staining buffer

125mL

02 淋巴细胞分离液

我们需要对外周血样本中的淋巴细胞进行检测时,为了减少其他细胞的干扰,可以只检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)包含淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞和其它少量细胞(造血干细胞等)。而细胞分离一直是个科研、医院新手小朋友的大难题,如何选分离剂,分离后该选哪个细胞层?

联科有专业的淋巴细胞分离液来应对啦,可以对外周血样本进行预处理!

外周血中各种血细胞的密度不尽相同,利用淋巴细胞分离液作密度梯度离心,使一定比重的细胞群按相应密度呈梯度分布,从而将血细胞进行分离。

血浆和血小板的密度较低,位于分离液的上部;

红细胞和粒细胞密度较大,沉于分离液的底部;

PBMC密度接近于分离液,位于分离液层,这样就可获得PBMC。

分离过程及操作图示

联科的淋巴细胞分离液(包含种属人的与小鼠的),通过内毒素检测(内毒素含量<0.06EU/mL),操作简单,用时短,分离效果好性能稳定,细胞存活率高。

淋巴细胞分离液产品

货号

名称 规格

LSM02

人淋巴细胞分离液(低内毒素)

200 mL

MLSM1092 小鼠淋巴细胞分离液

200 mL

 

03 红细胞裂解液(溶血剂)

科研上、临床上流式检测样本检测量大、任务繁重,不能每个样本都进行淋巴细胞分离,而市面上的仪器目前基本都不能直接上机检测全血样本。

针对这个现实难题,我们可以利用红细胞裂解缓冲液这个厉害的流式辅助试剂,来达到快速去除全血中的红细胞,顺带着组织和肿瘤制备的单细胞悬液中的红细胞也是可以去除干净的,同时含有稳定剂可以保护白细胞,免受低渗膨胀裂解带来的损伤。

这样,就可以在使用流式细胞仪检测血液、骨髓、肿瘤组织细胞悬液等样本时,消除红细胞产生的干扰,从而实现对白细胞的表面抗原的准确分析。

EDTA抗凝静脉血用流式细胞仪溶血剂(LS-02)裂解红细胞后,在流式细胞仪上进行分析。

FSC/SSC双参数点图上可清晰地分出淋巴细胞、单核细胞及粒细胞三群,且碎片很少。

从上图可以看到联科操作简单的红细胞裂解液,可以使红细胞裂解完全,性能稳定,且我们的试剂是在温和的低渗条件下裂解红细胞,很少细胞碎片产生。

红细胞裂解液(溶血剂)产品

货号 名称 规格
LYS FCM Lysing Solution (Fixative Free) 10× 100/250/500 T
LSC FCM Lysing solution for BC 100/250 T
LSB Lysing solution for FACS 10X 100/250/500 T
LS-02 流式细胞仪溶血剂 500 T

04 固定破膜剂

在平台上约不到仪器怎么办?有些样本有危险性怎么办?需要检测胞内的表达指标,但是不能营销膜表面的标记又该怎么办?

——答案是对细胞进行固定。

检测跨膜表达的蛋白怎么办?检测胞浆中的蛋白怎么办?检测核内表达的蛋白呢?检测信号通路中的磷酸化蛋白呢?

——答案是对细胞进行破膜处理,联科的破膜剂可以使抗体顺利进入胞内/核内,并使细胞形态仍然保持完整。

联科可以提供单独的已经配置好的固定剂,为4%多聚甲醛的PBS溶液,可直接用于组织和细胞固定。若需使用其他低浓度多聚甲醛,可使用0.01M PBS 按比例稀释。

联科也可以提供搭配好的固定破膜剂,无需另外购置搭配的试剂,分为破胞膜的跟破核膜的两种产品。可以做到溶血、破膜、染色一步完成,破膜后细胞分群保持完,既节约成本,又操作简便,同时还能保持检测抗体的特异性、灵敏度以及可重复性。

固定破膜产品

货号 名称 规格
F0001 多聚甲醛溶液,4% 100ml
GAS Fix & Perm Kit 50/100/200/500/1000T
IC001 FoxP3/Transcription Factor Staining Buffer Kit 20/100T

05 封闭试剂

Fc受体是指细胞膜表面能与免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE和IgD)Fc片段结合的受体,B细胞、NK细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和肥大细胞等细胞表面均有表达,对免疫系统具有保护功能。

FcR能够与抗体的Fc段结合,在检测时产生假阳性。 使用FcR阻断剂(CD16 (Fc γ III 受体)和CD32(Fc γ II 受体)对小鼠IgG Fc 片段具有低亲和力,减少非特异性结合),可对细胞表面的Fc受体进行封闭,可以消除假阳性,降低检测背景,获得更清晰的结果。

联科为大家精心准备的Fc阻断剂质优价廉,质控严格规格多样,现货供应封闭效果稳定可靠

封闭试剂产品

货号 名称 规格
F210163200 Anti-Mouse CD16/CD32 (2.4G2),Purified 25/100 μg
F210163201 Anti-Mouse CD16/32 (2.4G2), FITC 25/100T

06 细胞刺激/阻断剂

流式实验应用中,除了常见的表面抗原染色,还会进行胞内因子检测,而未活化的细胞分泌的细胞因子量非常少,用常规的流式检测方法很难检测到,因此在检测前需要刺激细胞,使其活化——此时我们需要辅助试剂,细胞刺激剂。

细胞在活化后,分泌的细胞因子会转运到细胞外,但常规流式检测主要对细胞表面或细胞内部的抗原进行检测,因此需要阻止细胞因子分泌到细胞外,使其聚集在细胞内,提高检出率——此时我们需要辅助试剂,细胞阻断剂。

联科的辅助试剂非常齐全,为大家提供的刺激+阻断剂诱导细胞活化能力强,操作简单,规格丰富,常备现货。

刺激阻断剂产品

货号 名称 规格
CS1001 PMA/Ionomycin mixture (250X) 100/500 μL
CS0001 Phorbol 12-myristate 13-acetate 100/500 μL
CS1002 BFA/Monensin Mixture (250X) 100/500 μL
CS0002 Ionomycin Calcium 50/500 μL

千万不要忽略“辅助”的作用,很多时候,它们会是影响实验成败的关键因素呦!联科生物流式系列辅助试剂,为您提供全面帮助,助力流式实验更高效、更稳定、更可靠的完成。