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作者：联科生物 发布日期：2014-02-07 15:00
 人外周血作为免疫系统来研究时，通常需要通过密度梯度离心去除红细胞。最常用的是利用Ficoll Paque将全血分成高于和低于1.077g/ml两种密度的组分。 外周血单个核细胞(PBMC)密度较小，位于Ficoll上层，也称为buffy coat。红细胞和包括中性粒细胞和嗜酸性粒细胞在内的多形核细胞(PMNs)密度大于1.077g/ml可被除去。嗜碱性粒细胞的密度在1.077g/ml左右，部分仍然存在于PBMC组分中。 PBMCs包括淋巴细胞(T细胞、B细胞和NK细胞)、单核细胞和DC细胞。在人类中，这些细胞群的比例在个体中有所差异。通常PBMCs中，淋巴细胞占70 – 90%，单核细胞占10 – 30%，而DC细胞则只占1 -2%。在淋巴细胞中，CD3+ T细胞占70 – 85%(在PBMCs中占45 – 70%)，B细胞占5 – 20%(在PBMC中最多15%)，NK细胞占5 – 20%(在PBMC中最多15%)。 CD3+ T细胞由CD4+ T细胞(在PBMCs中占25 – 60%)和CD8+ T细胞(在PBMCs中占5 – 30%)组成，两者比例在2：1左右。CD4+ T细胞和CD8+ T细胞可进一步分为幼稚细胞、抗原接触的中枢记忆细胞、效应记忆细胞和效应细胞亚群。 CD4+ T细胞为辅助性T细胞，根据特异性细胞因子、表面分子或转录因子可进一步分为各种功能亚群，包括调节性T细胞、Th1、Th2、Th17、Th9、Tfh和Tr1等亚型。而近年来发现CD8+ 细胞毒性T细胞的表型和功能差异非常大，也许有200种功能表型，因此对其的研究会非常复杂。在外周血中，B细胞分为过渡期、幼稚、记忆亚群以及浆细胞。DC细胞包括浆细胞样DC细胞(pDC)和髓系衍生的DC细胞(mDC)。单核细胞可分为经典单核细胞和非经典CD16+促炎性单核细胞，后者在单核细胞中最多占10%，具有独特的功能。 人类免疫系统的研究着重于对PBMCs的表型和功能研究。为了通过PBMCs研究人的免疫系统，了解外周血中存在的细胞种类，以及其如何在组织中分化和发挥功能是很重要的。最后，熟悉细胞表面和胞内表型鉴定、以及最适合的检测方法也是非常关键的。 |
