维持培养基：胚胎干细胞和诱导多能干细胞

PeproGrow-hESC人胚胎干细胞（hESC）和人诱导多能干细胞（hiPSC）的维持培养基产品特点：♦ 无酚红♦ 无胰岛素♦ 高铺板率♦ 极具竞争力的价格♦ 高品质的重组生长因子来自全球领先的生产商♦ 与美国Rutgers（罗格斯）大学干细胞培训中心合作开发， 并在该中心的培训教程中使用

酚红（Phenol Red）可增加活细胞荧光成像时的背景，并对细胞具有光毒性

Maintaining Live Cells on the Microscope Stage

Although the indicator dye is essential for routine cell culture, due to the high visible light absorption extinction coefficient, its use should be avoided in live-cell fluorescence imaging experiments in order to reduce the level of background noise and to prevent phototoxicity. Recognizing this fact, manufacturers provide most of the common media formulations in sterilized liquid or powder form without Phenol red

胰岛素(Insulin)则会干扰对由胚胎干细胞分化而成的胰岛素分泌细胞的检测

PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基是化学成分明确的完全培养基，不含血清和酚红，专门用于人类胚胎干细胞（hESCs）和诱导多能干细胞（hiPSCs）的无饲养层维持培养和扩增（需以BD MatrigelTM作为表面包被基质）。该培养基可保持hESCs 和hiPSCs的未分化、多能状态（SSEA4+/Oct4+），流式细胞术分析显示自发分化的细胞比例低于15%。该培养基的独特配方中含有FGF2（碱性成纤维细胞生长因子）等生长因子，但不含市场上大多数其他品牌胚胎干细胞培养基中存在的胰岛素。PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基由美国PeproTech公司和美国Rutgers（罗格斯）大学干细胞培训中心合作设计与研发，包含一瓶100ml或500ml基础培养基和一管单独的重组生长因子冻干粉。

图1：PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基诱导多能干细胞（hiPSCs）的免疫荧光染色hiPSCs细胞接种于24孔板，多聚甲醛固定、DAPI和图中标示的抗体荧光染色显示出细胞的多能性

图2：人胚胎干细胞（hESCs）在PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基中培养的细胞形态PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基中含有独特的细胞因子组合，起初可能会改变细胞或克隆的外观，使它们看起来更为平整和形态多样。但是随着细胞密度的增大和经过数代传代后，这种形态改变越发不明显。干细胞将形成标准的致密圆形克隆（左图），细胞形态正常，并具有较大的细胞核和较少的细胞质（右图）。

图3：H1人胚胎干细胞的生长H1人胚胎干细胞（hESC）在PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基中培养、Dispase酶消化传代，并用含2u MY027632（Rho激酶抑制剂）的PeproGrow-hESC胚胎干细胞培养基铺板与包被有BD MatrigelTM的6孔板中。每天换液、并分别在传代后24,48,72小时拍照。该hESC经慢病毒（Lentivirus）感染改造，使得其含有Oct4启动子驱动表达的turboGFP荧光蛋白基因，因此图中绿色荧光为Oct4启动子发挥活性所致，提示细胞保持着多能性。