TrueBlot——特殊二抗

介绍：

TrueBlotTM系列二抗为美国ROCKLAND公司的优质二抗。因为TrueBlotTM系列二抗能够高亲合力的结合带有天然二硫键结构的IgG(Goat, mouse或Rabbit)，因此其仅检测非还原型的IgG。

免疫沉淀后的免疫印迹过程中必然涉及到免疫沉淀用一抗(多为IgG)的变性，因此如果使用传统的二抗(非还原和还原型的IgG均能检测到)会在印迹膜上出现杂带的干扰，也就是说，由于传统的二抗能与还原型的IgG结合，在印迹膜上显示出~55kDa的重链条带和~23kDa的轻链条带，这些均为非特异性条带，对免疫印迹结果的分析带来很大干扰。

如果使用TrueBlotTM系列二抗则可避免上述情况，特异地检测出免疫沉淀而得的抗原(如右图）。

用3ug Rabbit anti-Human Stat1抗体从0.5ml(1x107个 /ml) Jurkat细胞中免疫沉淀出Stat1蛋白，然后电泳、转膜，并用Rabbit TrueBlotTM和传统的HRP标记二抗对免疫印迹膜进行检测。

道1：用Rabbit IgG TrueBlotTM检测；

道2：用传统的HRP标记anti-Rabbit IgG二抗进行检测。

结果可见：用传统的HRP标记二抗检测(道2)时会出现轻链和重链条带，而用Rabbit IgG TrueBlotTM检测时则没有(道1)，表明TrueBlotTM检测天然的抗体，而不检测变性的轻链和重链，使得免疫沉淀后的免疫印迹结果非常清晰和特异。

特点：

1、完全排除变性的免疫沉淀用一抗的干扰，结果清晰、准确；

2、使用简单，仅将传统的二抗替换成TrueBlotTM系列二抗即可。

注意要点：

1、需对免疫沉淀物进行彻底还原；

2、免疫印迹时需用牛奶作为封闭液，而不能用BSA(牛血清白蛋白)，因为后者的封闭作用不强；

3、当用Rabbit IgG TrueBlotTM对免疫印迹膜进行检测时，要先用anti-Ig微球来进行免疫沉淀步骤，而不能使用蛋白A或蛋白G微球，因为后者与Rabbit IgG有很强的亲合力，会引起污染。

产品信息：