使用eBioscience流式抗体的常见问题

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https://www.liankebio.com/article-information_Tech-1607.html

作者:eBioscience官网 发布日期:2014-03-16 13:00

Q. 是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白?
我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液,这会改变产品的特性。通常在运输过程中,液体有可能已经分散在管子中。推荐使用之前,瞬时离心,这样抗体会沉到管底,以达到标示的体积。
Q. 我能涡旋震荡已经标记了抗体的细胞样品吗?
可以,短时震荡能保持细胞的最佳状态。
Q. 标记了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的细胞样品能固定并保存吗?
大多数情况下,可以将样品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中,暗处4°C 最长可以保存3天,对检测没有影响。某些影响可能与克隆号有关。
Q. 不能马上检测的样品,我该如何保存?
首先,要获得最好的效果,一定是推荐立即上机检测。

要保存染色完成的样品,可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存,暗处4°C 最长可以保存3天。对于tandem染料,如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等,eBioscience的数据显示不会增加它们与APC或者PE的补偿。某些影响可能与克隆号有关。
Q. 我可以用自己配制的固定缓冲液来保存细胞吗?
我们不推荐使用其他缓冲液,我们只能确保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。
Q. 有文献提到与DEC205+ cells存在不兼容的情况,我能选择哪些其他的标记呢?
其实CD205已被证实可以与PE-Cy5.5标记抗体和链霉亲和素标记物结合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而,不能用于CD205+ 的树突状细胞。我们推荐使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 标记来替代。