关于磁分选过程中的红细胞裂解

  • Post category:生物资讯
  • Post views:3812 次访问

https://www.liankebio.com/article-information_Tech-1523.html

作者:美天旎官网 发布日期:2013-11-29 06:00

通常红细胞裂解会产生死细胞和细胞碎片,从而引起非特异性结合,也增加了额外的步骤。

为了得到最好的结果,使用新鲜的标本。对于含红细胞较少的组织,没有必要裂红。对于小鼠脾脏,可先切成小块,在网筛上研磨,先过100μm滤网,再过一次30μm滤网更好。用美天旎的阴选试剂盒时,由于试剂盒中已经带有针对红细胞的抗体,因此既不需要红细胞裂解,也不用密度梯度离心。

对于人类标本,可以用全血的磁珠。其他产品则需在磁珠标记或细胞分离前,用密度梯度离心去除红细胞。通常离心后也不必要裂红,因为大部分红细胞都去除了。对于阴选的试剂盒,同样cocktail中含有了红细胞的抗体,可以去除密度梯度离心后剩余的红细胞。

如果必须将全血裂红,推荐在标记前进行。关键的是裂解的时间,过长会导致死细胞增多。细胞表面的抗原不会受到影响,但死细胞会增加非特异性结合,影响磁珠结合效率,导致实验结果不佳。