流式凋亡数据分析实操：2步搞定Annexin V凋亡结果
做流式凋亡检测时，是不是常对着密密麻麻的散点图犯愁？补偿没调好导致数据偏差，圈门位置不对让结果失真 —— 别担心，这篇纯干货手把手教你搞定 Annexin V-FITC/PI 双染数据分析，小白也能快速上手！以后做其他荧光标记的Annexin V凋亡数据分析也能举一反三。 一、荧光补偿调节（以 Annexin V-FITC/PI 为例） 在流式细胞仪上，用空白管调节 FSC vs. SSC (li…
2025-08-19
90% 的人都栽了！流式凋亡样本制备避坑指南
同样的试剂盒，为啥有人能做出漂亮的象限图，你的数据却直接报废？别愁！问题就藏在样本制备的那些 “魔鬼细节” 里。今天这篇超全避坑指南，手把手教你避开雷区，轻松 get 理想结果。 一、细胞收集 ——90% 假阳性的罪魁祸首！ 1.悬浮细胞 （1）用移液枪小心吸取含细胞的培养基，轻轻转移到提前 4℃预冷的离心管中。 （2）设置 500g离心 5 分钟，弃上清时枪头贴壁缓慢吸液。 （3）加入 1ml …
2025-08-12
流式凋亡试剂盒选择 —— 选对工具，成功一半
做流式细胞凋亡检测时，你是不是也遇到过这些问题：结果忽高忽低没不稳定、换了仪器数据就不准、GFP 细胞总有荧光干扰…… 其实，很多时候不是操作出了问题，而是试剂盒没选对！ 选对试剂盒，不仅能让数据精准可靠，还能少走弯路、节省时间 —— 今天就教你一套 “试剂盒精准匹配指南”，小白也能秒变选品高手！ 第一步：看仪器！按流式细胞仪 “对号入座” 流式细胞仪类型是选择试剂盒的基础，不同仪器适配的试剂盒大…
2025-08-05
警惕！凋亡证据链断裂，5大热门领域审稿质疑！
细胞凋亡（apoptosis）是基因控制的 “程序性细胞自杀”，其过程具有鲜明特点：DNA不碎、炎症不爆，早期仅磷脂酰丝氨酸外翻，晚期才出现膜破核裂，常用Annexin V流式的方法检测。 在科研领域，细胞凋亡相关研究至关重要。肿瘤药效、免疫杀伤、纳米毒理、干细胞质控、临床前GLP安评 —— 这 5大热门领域，只要审稿人找不到可溯源的凋亡数据，就可能质疑研究的可信度！ 为什么凋亡数据如此关键？ 细…
2025-07-30
流式三要素之一 | 样本篇
做流式实验需要仪器、样本以及试剂，对于流式实验而言，样本质量的高低对最终的检测结果有很大的影响。进行流式实验的样本多为外周血、骨髓、各类体液（如脑脊液、胸水、腹水）以及人体的组织（如淋巴结、脾、肝等）。不同的样本处理方法不同，想要获得好的检测结果，样本的制备和保存很关键。 本文就为大家分享各种样本的详细处理方法。 1.外周血/骨髓 样本保存： 收集样本后置于加有抗凝剂（一般选择肝素或EDTA）的试…
2025-03-11
蛇年第一课|小科带你回顾凋亡实验及其检测要点
细胞凋亡（apoptosis），属于细胞程序性死亡（Programmed Cell Death，PCD），是由基因控制的细胞自主、有序的死亡，在维持生物体内环境稳定方面发挥着重要作用。 细胞凋亡与疾病的关系 对于人而言，健康状况下，机体内细胞凋亡处于一个平衡状态。当细胞凋亡出现异常，就极易引发各种疾病。 细胞凋亡典型特征 从形态学角度观察细胞凋亡，其过程是多阶段的，首先是细胞体积缩小，连接消失，与…
2025-02-18
流式细胞术—FAQ（二）
11. 为什么检测小鼠CD3ε而不是CD3？ CD3是由多条肽链组成的复合体，包括CD3ε, CD3δ, CD3γ, 和CD3ζ。其中，CD3ε是最常用的标记，因为它在T细胞中相对特异性地表达，并且可以单独作为一个可靠的标志。相比于整个CD3复合体更具特异性，可以减少检测中的非特异性信号或交叉反应，提升检测的灵敏度和准确性。 12. CD8和CD8α的区别？ CD8是一个复合体，由CD8α 和CD…
2025-01-21
流式细胞术—FAQ（一）
1.流式染色条件是什么？ 一般推荐室温染色15分钟；或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂？ 正常情况下，外周血中仅有极少量的Th1、Th2，IFN-γ、IL-4含量极少，无法检测到，需要刺激剂（PMA/Ionomycin Mixture）将Th细胞刺激分泌细胞因子，细胞因子产生后会被分泌到细胞外，无法进行检测。加入阻断剂 （BFA/Monensin M…
2025-01-14
