还在Th17检测中挣扎,这份攻略治愈你

通常所说的Th17是指在各种生理与病理条件下有能力分化为Th17的辅助性T细胞 (严格意义上是Th0)。当受到外界因素(如刺激素、病原体等)刺激,Th0即会向Th1、Th2、Th17等Th细胞分化,此时,通过检测分泌的细胞因子(如IFN-γ、IL-4、IL-17等)实现对各类Th细胞的检测。 Th17:主要分泌IL-17、IL-22等促炎因子,介导自身免疫性疾病和炎症反应。 考虑到静息…

如何检测Th1/Th2细胞因子:样本处理 - 刺激染色 - 流式分析 - 结果示例

Th1和Th2亚群检测 通常所说的Th1、Th2是指在各种生理与病理条件下有能力分化为Th1、Th2的辅助性T细胞 (严格意义上是 Th0)。静息状态 (未受任何刺激,如人的正常生理状态)下,Th0分化为Th1、Th2的能力非常弱;当受到外界因素(如刺激素、病原体等)刺激,Th0即会向Th1、Th2等Th细胞分化,此时,通过检测分泌的细胞因子(如IFN-γ、IL-4等)实现对各类Th细…

Th细胞检测方案 - 技术要点汇总

Th检测一般操作步骤 人/小鼠/大鼠Th检测方案 人/大鼠Th1/Th2CD3/CD8/IFN-γ/IL-4小鼠Th1/Th2CD3/CD4/IFN-γ/IL-4 由上图可知,抗凝剂选择肝素钠或肝素锂,不影响Th细胞的活化和细胞因子的分泌。 非肝素抗凝血(如ETDA、枸橼酸钠抗凝血),可通过淋巴细胞分离液处理后,再进行刺激/阻断,仍然可以检测到细胞因子,如下图:

小鼠Th1/Th2的检测

检测原理 小鼠Th1/Th2细胞与人的相似,均可分泌多种细胞因子: Th1 细胞主要分泌 IL-2、IL-12、IFN-γ和 TNF-β/α等 Th2 细胞主要分泌 IL-4、IL-5、IL-6 和 IL-10 与人相同,鉴别 Th1/Th2同样采用下面的组合: Th1:CD4+IFN-γ+, Th2:CD4+IL-4+ 刺激素也是我们通常选用的为PMA(佛波酯)+ Ionomycin(离子霉素)…

人 Treg 试剂盒操作步骤

制备 PBMC,并调整细胞浓度至 107/mL。 在每个流式上样管中加入 100 μL 准备好的细胞悬液,细胞数约为 1 × 106 个。 按照细胞表面抗原染色方法标记 CD4 和 CD25。根据说明书和抗体管上的标识确定抗体用量(一般来说是 20μL,可能随批次有差异)。按个人要求设置空白管、对照管、补偿管和样本管。4℃ 孵育 30 分钟。 用预冷 PBS 溶液洗涤细胞,300-400 g 离心…