有料视频丨ELISA、FCM、WB 小知识分享

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ELISA:酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA),将抗体或抗原包被到酶标板上,利用抗原抗体的特异性反应,对样本中可溶性目的产物进行定性分析和定量检测。ELISA 可用于测定抗原,也可用于测定抗体,根据试剂的来源和样本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法,主要类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法和双抗原夹心法等。ELISA 被认为是蛋白质测定的金标准,是免疫学中的经典实验。

FCM:流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM),在流动的状态下,快速检测悬液中单细胞或其他生物颗粒的散射光信号和荧光信号,高速、准确地实现细胞的定量分析和分选。散射光信号分为前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),反映细胞自身状态,FSC 反映细胞大小,SSC 反映细胞颗粒度、复杂程度;荧光信号(FLs)分为自发荧光和抗体标记的荧光,荧光信号的强弱反映细胞抗原的表达含量。FCM 是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

WB:免疫印迹(Western Blot,WB), 通过电泳区分不同的蛋白组分,并转移至固相支持物,以特异性抗体作为探针,通过分析着色位置和着色深度对靶蛋白进行检测,可以判断特定蛋白在样本中是否表达并粗略分析特定蛋白表达量的高低。WB 是分子生物学、生物化学和免疫遗传学研究中常用的一种实验方法。

做免疫实验的小伙伴对这三种方法一定有所了解,我们将在丁香学社和大家分享 FCM、ELISA 和 WB 的原理、应用及常见问题分析等内容。丁香学社,作为科研人的专属视频学习中心,特邀请杭州联科生物的申俊老师对这 3 个主题进行了精彩的讲解。

ELISA 实验原理与常见问题分析

  • ELISA 基本原理;
  • ELISA 试剂盒选择指南;
  • ELISA 操作注意事项及常见问题分析。

流式细胞术原理及应用示例

  • 流式细胞术基本原理;
  • 细胞凋亡检测常见方法解析;
  • 细胞周期检测注意事项;
  • 免疫分型案例分析,常见问题解答。

Western Blot 原理及常见问题

  • Western Blot 基本原理;
  • Western Blot 实验流程;
  • Western Blot 常见问题分析。