师弟，你以后要做WB吗
要啊
那你知道内参抗体吗
不是很清楚诶
那让为兄告诉你好了
好啊敲黑板！知识点哈
内参是内在参照，在各组织和细胞中表达相对恒定，在检测某些功能蛋白的表达水平变化时用它做参照物，可以校正蛋白定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。常见的主要有Actin、GAPDH、Tubulin：
Actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。β-actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分，也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分，分布广泛。β-actin抗体是Western Blot很好的内参，分子量大小为42kDa左右。不适用于骨骼肌样本。
GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western Blot蛋白质标准化的内参。在一些病理情况下如组织缺氧、糖尿病等，某些类型的细胞中GAPDH表达会增加。
Tubulin即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin，其中α-Tubulin和β-Tubulin(55kDa)是形成微管的最主要的两种Tubulin。作为内参，β-tubulin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western Blotting时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。对抗菌和抗有丝分裂药物耐受时，Tubulin的表达会有所改变。
如 何 选 择 内 参 ?
? (1) 目的蛋白大小：建议内参与目的蛋白的分子量最好相差5kDa以上；
? (2) 样本的组织来源：某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合用GAPDH做内参；
? (3) 内参抗体可检测的种属类型越多，在使用过程中的选择余地就越大；单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体；
? (4) 抗体的效价：即相当于实际应用时的稀释比率；
? (5) 内参抗体哪家好，联科生物来帮你：联科生物的内参抗体均为小鼠单抗，且稀释比均达到1:1000-1:10000。
联 科 内 参
| 目录号 | 产品名称 | 规格 | 目录价 |
| ab008-040 | β-Actin Mouse mAb | 40 μL | 490 |
| ab008-100 | β-Actin Mouse mAb | 100 μL | 980 |
| ab009-040 | β-Tubulin Mouse mAb | 40 μL | 490 |
| ab009-100 | β-Tubulin Mouse mAb | 100 μL | 980 |
| ab010-040 | β-Actin-HRP Mouse mAb | 40 μL | 590 |
| ab010-100 | β-Actin-HRP Mouse mAb | 100 μL | 1180 |
| ab011-040 | GAPDH-HRP Mouse mAb | 40 μL | 590 |
| ab011-100 | GAPDH-HRP Mouse mAb | 100 μL | 1180 |
| ab012-040 | β-Tubulin-HRP Mouse mAb | 40 μL | 590 |
| ab012-100 | β-Tubulin-HRP Mouse mAb | 100 μL | 1180 |
| Mab5465-040 | Anti-GAPDH monoclonal antibody | 40 μL | 400 |
| Mab5465-100 | Anti-GAPDH monoclonal antibody | 100 μL | 800 |
内 参 引 用 文 献
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