离开了细胞培养皿,还能愉快做实验吗?

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作者:佚名 发布日期:2017-05-05 10:00

—— 细胞培养皿的使用须知 ——
培养皿一般用玻璃或塑料制成,是培养微生物或细胞培养的常用实验耗材,通常玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。培养皿易碎,在清洗和使用时要小心轻拿轻放,使用完后要及时清洗干净,存放在安全、固定的位置。
—— 培养皿的清洁 ——
1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。

2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。

3、.浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。

4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。
—— 培养皿的分类 ——

1、根据培养皿用途的不同可分为细胞培养皿和细菌培养皿。

2、根据制造材料的不同分为塑料培养皿和玻璃培养皿,但进口培养皿和一次性培养皿大都是塑料材料。

3、根据大小的不同通常可分为直径为35mm,60mm,90mm。150mm培养皿。

4、根据分隔的不同又可分为2分隔培养皿,3分隔培养皿等。

5、培养皿材质基本上分为两类,主要为塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。

—— 平版培养时为何把培养皿倒置 ——
1、操作时培养皿盖上可能粘有水珠或者细菌,倒着培养可以避免培养皿盖上的水珠或者微生物落在培养皿上。

2、培养过程中,细菌在代谢繁殖过程中会产生一些有害于细菌生长繁殖的代谢物,释放热量及有水排出,如果不倒着培养会有水珠滴落到培养基中,影响菌落的生长。

3、如果培养目标是收集细菌代谢物,而且代谢物易溶于水,倒着培养可能会方便收集。

培养时培养皿中会产生较多的水蒸气,水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴,如果培养皿正置,水滴滴下会将菌落冲散,这样的话一个大菌落可能会分散开成为很多小菌落,对细菌的培养和计数都造成很大的麻烦。如果导致的话,培养基在上,皿盖在下,水滴滴下不会滴到菌落上。
—— 培养皿使用注意事宜 ——
1、使用前经过清洁消毒,培养皿清洁与否对工作影响较大,可影响培养基的酸碱度,若有某些化学药品的存在,会抑制细菌生长。

2、新购的培养皿应先用热水冲洗,再置于质量分数为1%或2%的盐酸溶液中浸泡数小时,使游离碱性物质除去,再用蒸馏水冲洗2次。

3、若要培养细菌,再用高压蒸气(一般6.8*10的5次方Pa高压蒸气),120℃的温度下30min灭菌,置室温中干燥,或用干热灭菌,就是将培养皿置于烘箱内,温度控制在120℃左右的情况下维持2h,即可杀死细菌的胞牙。

4、经过消毒的培养皿才能接种培养使用。