白细胞-血小板聚集检测方法简介

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1. 检测意义
白细胞-血小板聚集包括单核细胞-血小板聚集和中性粒细胞-血小板聚集等,血小板脱颗粒时 P-选择素(CD62P)的外露是形成白细胞-血小板聚集的必要条件。
临床研究发现,稳定性冠状动脉疾病和静脉血不足时,循环血液中的单核细胞-血小板聚集物(而不是中性粒细胞-血小板聚集)是比检测血小板活化指标--CD62p 更加敏感的体内血小板活化标志。
循环血液中的白细胞-血小板聚集物在急性心肌梗塞、不稳定心绞痛、稳定性冠状动脉疾病和心肺分流术中升高。在冠脉血管成形术,尤其是晚期时,循环血液中的白细胞-血小板聚集物有较大的增多。

2. 检测项目
CD45,CD42b,CD14, CD41

3. 检测标本
抗凝全血(柠檬酸钠抗凝)

4. 推荐抗体组合

管号

FITC

PE

1

Mouse IgG1

Mouse IgG1

2

CD45

CD42b

3

CD14

CD41

5. 检测步骤
1) 抽取静脉血 2 mL,柠檬酸钠抗凝。血液采集后 1 小时内进行实验;

注:抽血时尽量不要用止血带,以免引起人为活化。

2) 在流式管内加入 100 uL PBS 和 5 uL 抗凝血;

3) 加入适量的抗体和同型对照;

4) 室温、避光染色 15 分钟;

5) 加入 1 mL PBS,上机检测。

6. 结果判断
1) 下图最右侧图中 CD45/CD42b(GPIb)双阳性群体为白细胞-血小板聚集物。

2) 若想分别得到单核细胞-血小板聚集(monocyte-platelet aggregates)和中性粒细胞-血小板聚集(neutrophil-platelet aggregates)的数值,请按下图用 CD14 和 CD41 分析。