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『日常』之大师兄and小师妹

作者:联科生物    发布日期:2019-08-28 09:00

烈日炎炎似火烧,广大留校的大师兄们、小师妹们又双叒叕献身科研啦。

小师妹:大师兄大师兄,我做ELISA标准曲线的时候,最高点吸光值总是特别高咋办哩?

大师兄:是不是标准品溶解、稀释操作错了?
小师妹:我都是按照说明书来操作哒,检测也是450nm/630nm双波长检测……
大师兄:如果OD值靠谱的话,那可能是显色时间太长 显色过度嘞...ELISA试剂盒说明书中的显色时间为5~30min,具体的需要我们自己判断哈!

大师兄:看到标准品孔S1~S5显色程度像图中这样就可以加终止液啦

 

小师妹:颜色这么浅就可以啦....我还一直怕是我看错了,不敢加终止液

小师妹:

 

大师兄:担心的话也可以通过仪器来判断哈。630nm波长下,标准品S1孔的OD值达到0.6~0.65,就可以终止显色了

小师妹:嗯呐 下次我会随时关注显色颜色变化哒

大师兄:做ELISA实验的时候,有些点你需要特别注意的哈:

• 1.移液操作时,酶标板孔中要垂直悬空加入液体,避免加到孔壁上;

• 2.实验前将所有试剂平衡至室温;

• 3.标准品粉末溶解前需要先短暂离心,使管内标准品全部集中在管底;

• 4.实验要做复孔,减少误差;

• 5.振荡孵育,加强反应;

• 6.每次洗板必须将洗液弃干净;

• 7.酶标仪检测前预热,双波长检测;

• 8.注意显色判断,适时终止。

大师兄:以后你就是我们实验室了不起的大师姐嘞

小师妹:

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