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真?假?ELISA试剂盒选择要小心

作者:联科生物    发布日期:2020-04-14 08:30



要问科研最怕遇到的糟心事,非买到假冒科研试剂莫属了,用假冒试剂无非导致两种结果:实验失败or被动学术造假。ELISA试剂盒门槛较低,制假相对简单,常有不法商家打着种属全、指标全、现货供应的旗号来生产、销售假冒ELISA试剂盒,曾有老师吐槽“每个月都能收到好几个从未听过的厂商向我推销ELISA试剂盒”。针对ELISA试剂盒真假问题,我们整理了一些辨别经验(购买前and购买后),希望对大家有所帮助。

 

<    购  买  前   >


1.选择正规公司

进口试剂盒尽量选择Thermo、 R&D等知名公司;国产试剂盒一定要选择大型正规企业,比如联科生物。将“厂家名”、“ELISA”和“假货”等关键词在网上搜索,有的网站或论坛如丁香园等会有打假曝光平台。正规厂商的ELISA试剂盒通常有技术发明专利支撑和ISO9001国际质量体系认证,且厂家会定期收集整理试剂盒的文献引用情况,购买前可向厂家索要相关材料加以核实。


2.试剂盒性能参数

向厂家索要或从其官网下载产品说明书和质控报告,查找ELISA试剂盒的关键质控性能参数:准确度(加标回收率、稀释线性)、精密度(板内差、板间差)、灵敏度、样本值、特异性、校准。如果无法提供这些性能参数数据,则说明试剂盒开发过程不够科学严谨,并未做试剂盒性能测试从而无法得到准确真实的结果,也有极大可能是假货试剂盒。


3. 不常见指标的选择

如需检测不常见物种的样本(如禽类、猪、羊等),可选择靠谱的生物网站或知名ELISA试剂盒供应商。其实,“货比三家”有时会有一些“惊喜”,也许你会发现:某个公司的说明书除了指标名称不一致,其他内容基本一样;某个指标,几家公司试剂盒的性能参数完全一样…一定要记住:关于网上宣传有所有种属所有指标ELISA试剂盒的公司,那真的是再谨慎也不为过。
 

4. 所有指标常备现货

抗体并不十分稳定,针对非热门研究指标,厂家为保证产品质量通常不会长期备现货,若承诺相对冷门的ELISA试剂盒能随时发货,那需谨慎考虑是否要选择该供应商。

 

<   购  买  后  >


1. 检查

检查说明书、包装盒的质量,通常假冒伪劣产品为了降低成本,印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书,如上所示查找ELISA的性能指标。


2. 实验

(1)利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原

• a. 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;

• b. 37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体;

• c. 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物;

• d. 实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为假货ELISA试剂盒;

• e. 如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

 

(2)如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假

• a. 取出购买的试剂盒A的包被板两条;

• b. 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线;

• c. 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线;

• d. 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物;

• e. 实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为假货ELISA试剂盒;

• f. 如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。

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