流式前沿 | 汉族成年人淋巴细胞亚群多中心参考区间建立

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外周血淋巴细胞亚群(TBNK)是反映机体免疫状态的关键指标。TBNK检测已广泛应用于各大学科的临床诊断领域,为医师提供有价值的辅助诊断信息,监测患者在治疗过程中的免疫状态变化趋势,评估治疗效果以及预后效果。

但是,国内并没有建立统一的TBNK正常参考区间,这对TBNK检测结果的标准化解读和临床意义的持续拓展产生了不利影响。一直以来,国内关于TBNK参考区间的研究,大都是以单中心为对象进行的,这样得出的参考区间毫无疑问有一定的局限性。

CD3+T细胞参考区间来源(图片来源:免e监控)
CD3+T细胞参考区间来源(图片来源:免e监控)

有调查显示,大部分医疗单位所使用的TBNK参考区间数据还来自于产品说明书或实验室小规模自建数据。各实验室之间所使用的参考区间参差不齐,有些甚至相差数倍。这就致使各实验室检测结果难以得到互相之间的认可,也增加了临床误诊的风险。

部分实验室TBNK检测的参考区间(图片来源:免e监控)
部分实验室TBNK检测的参考区间(图片来源:免e监控)

来自复旦大学附属中山医院、北京大学第一附属医院和广州中医药大学附属第二医院的研究团队合作,进行了一项针对中国多中心人群的研究。该研究募集了表观健康人群的血液样本进行TBNK检测分析,旨在建立认可度更高、更科学的成年人TBNK参考区间。2021年10月,该研究的成果发表于Annals of Translational Medicine,题为Establishment of the reference intervals of lymphocyte subsets for healthy Chinese Han adults and its influencing factors

来自中国大陆3个区域(北部、东部、南部),年龄在18岁至59岁之间的496个人(皆为汉族)被纳入研究。每个区域的样本同时用3台流式细胞仪(FACSLyricTM、FACSCantoTM II及FACSCaliburTM)进行TBNK检测和细胞绝对计数。在这个过程中,研究团队对这些样本进行了性别分层以及年龄分层(18-29岁、30-39岁、40-49岁、50-59岁),且每个分层都有足够多(>120)的样本数量用于检测。最后,对流式细胞术的检测结果进行方差分析和Z检验,以确定年龄、性别和仪器对人外周血TBNK的影响。

主要研究结果

检测结果间的性别差异

CD4+T细胞(%):女性高于男性;NK细胞绝对计数:男性高于女性(各性别组上下两条线分别代表2.5百分位、97.5百分位水平)

检测结果间的性别差异(图片来源:免e监控)

检测结果间的年龄差异

B细胞的百分比、绝对计数:30岁以下男性均高于30岁及以上男性,但无需分层建立参考区间;CD4+/CD8+比值:40岁以下人群显著低于40岁及以上人群,需分层建立参考区间。

检测结果间的年龄差异(图片来源:免e监控)
检测结果间的年龄差异(图片来源:免e监控)

多中心人群的TBNK参考区间

总体来看,性别和年龄是影响人TBNK水平的因素。该研究建立了中国汉族成年健康人群的TBNK参考区间,对国内外周血TBNK检测的标准化具有重要意义。

TBNK参考区间
TBNK参考区间

该研究是国内首次使用标准化的、基于流式细胞术的单平台方法建立TBNK参考区间的全国性研究。研究团队在募集样本时充分考虑了地域分布、性别、年龄相关因素对于免疫水平的影响,在一定程度上保证了样本的广泛性与代表性。此外,研究团队严格把控样本的纳入和排除标准,确保样本供体身体健康。