流式胞内染色步骤

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使用FIX & PERM固定破膜剂

  1. 制备好细胞悬液，取100ul（全血样本：人100ul，小鼠30~50ul）染表面抗体，室温避光孵育15min，不用洗涤
  2. 加入100ul FIX&PERM MEDIUM A，室温孵育15min
  3. 加入3ml流式染色缓冲液（Flow Cytometry Staining Buffer）300g离心5min，弃上清，涡旋振荡，使残留液体混匀沉淀
  4. 加入100ul FIX&PERM MEDIUM B和胞内抗体（和/或相应的同型对照），室温避光孵育15min
  5. 加入3ml流式染色缓冲液，300g离心5min，弃上清收集细胞
  6. 用 500ul 流式染色缓冲液重悬细胞，上机检测并分析。如不能立即检测，用0.5ml 0.1~4%多聚甲醛重悬4℃避光保存24小时内上机分析

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