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流式胞内染色步骤

作者:联科生物    发布日期:2018-11-12 09:30

 

 

流式胞内染色步骤

(使用FIX & PERM固定破膜)


制备好细胞悬液,取100ul

(全血样本:人100ul,小鼠30~50ul)

染表面抗体,室温避光孵育15min,不用洗涤

加入FIX&PERM Reagent A 100ul室温孵育15min

加入3ml流式染色缓冲液(Flow Cytometry Staining Buffer)

300g 离心5min 弃上清收集细胞

液体尽量倒干净,不要残留

涡旋混匀沉淀,加入FIX&PERM Reagent B

100ul和胞内抗体

(同型对照管加入同等剂量的抗体)

混匀,室温避光孵育20min

加入3ml流式染色缓冲液,300g离心5min弃上清收集细胞

用0.5ml 流式染色缓冲液重悬后立即上机。

或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小时内上机分析


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