用流式进行高等植物的DNA倍体分析

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作者:联科生物 发布日期:2008-08-13 13:00

1984年De Laat和Blass用纤细单冠菊(Haplopappus gracilis)的悬液细胞第一次对植物染色体悬液进行流式分析,但核型不稳定。随后Conia(1987)等尝试着从幼叶原生质中分离出染色体进行分析,但由于细胞同步化程度较低,这种方法没有得到广泛的应用。直到1992年Dolezel用根尖分裂组织制备细胞悬液,由于大多数植物的根尖较易获得且其核型较稳定,因此利用根尖材料制备染色体悬液成为广泛使用的方法。
然而,大多数植物标本采集后要放置一段时间,此时可采取的办法只有冰箱短时贮存或用固定剂固定。然而固定的组织其PI染色的荧光强度会降低5~7%,CV不会增加,但核可能会聚集影响检测。

Herbarium标本是更普遍的植物组织保存方法。本文以天然多核型的Vaccinium subg. Oxycoccus (Cranberry)作为模式生物,并比较了四种干燥方法、60多种植物,保存时间最长达3年,证明用干燥的植物组织作为DNA倍体分析的样本是一种可靠有效的方法。

A:室温贮存9个月的标本; B:冷冻保存30个月的标本