PeproTech hESC与hiPSCs维持培养基

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作者:联科生物 发布日期:2016-07-26 10:00

PeproTech  hESC与hiPSCs维持培养基
PeproGrow hESC培养基是无血清、无酚红的完全培养基,其化学成分明确,专用于人胚胎干细胞(hESCs)和人诱导多能干细胞(iPSCs)的无滋养层(feeder-free)培养与扩增,需用康宁的Matrigel®作为包板基质。用该培养基培养hESCs和iPSCs时,可保持细胞的未分化和多能性状(表型为:SSEA4+/Oct4+),流式细胞术显示,自发分化的细胞少于15%。该培养基独有的配方中含有FGF2(FGF-basic)等生长相关的因子,但不含市场上其他大多数Hesc/iPSC培养基中所含的胰岛素。PeproGrow hESC培养基是PeproTech和美国罗格斯(Rutgers)大学干细胞培训中心共同设计研发的,试剂盒中包含100mL或者500mL瓶装液体基础培养基,以及一管单独的生长因子冻干粉。

? 无酚红,无胰岛素? 完全培养基,化学成分明确? 高铺板效率? 培养基试剂盒中的高品质重组生长因子源自顶级生产商? 与美国罗格斯(Rutgers)大学干细胞培训中心合作研发并在其培训课程中使用 图1:人胚胎干细胞H1在PeproGrow-hESC培养基中的生长 在PeproGrow-hESC培养基中培养的人胚胎干细胞H1,经Dispase分散酶消化后铺板与康宁Matrigel®包被的6孔板中,然后在含有2μM Y-27632(Rho激酶抑制剂)的PeproGrow-hESC 培养基中继续培养,每天换液,并分别在传代后24,48和72小时拍照。该胚胎干细胞经慢病毒(Lentivirus)感染改造,使得其含有Oct4启动子驱动表达的turboGFP荧光蛋白基因,因此图中的绿色荧光为Oct4启动子发挥活性所致,提示细胞保持着多能性。 图2:人胚胎干细胞在PeproGrow-hESC培养基中培养时的细胞形态

PeproGrow-hESC培养基中含有独特的细胞因子组合,在培养伊始可能会改变细胞或者克隆的形态,使克隆更加扁平、多变。然而,这种形态学上的改变会随着细胞密度的提高和几次传代后而显著减少。干细胞会形成标准的紧密环形克隆(左图),并可见较大的细胞核和较少的细胞质(右图)。
图3:人iPSCs在PeproGrow-hESC培养基中培养的免疫染色结果
人iPSCs接种于24孔板,多聚甲醛固定,然后用DAPI和图中标示的抗体免疫荧光染色,抗体的阳性表达提示细胞保持着多能性。

产品编号 产品名称 规格
96-BM-hESC-100 PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media 100ml
96-BM-hESC-500 PeproGrow-hESC Embryonic Stem Cell Media 500ml