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作者：联科生物 发布日期：2015-04-01 09:00
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蛋白样品制备是免疫印迹(Western Blot)的第一步，也是决定实验成败的关键步骤之一。在蛋白提取和定量后，需要加入蛋白上样缓冲液对蛋白进行处理，使蛋白样本能在电泳中进行分离。
一般用于 Western Blot 的抗体只能识别抗原蛋白中的线性序列结构表位(一级结构)，因此，为使抗体能够结合该表位而需要将蛋白样品进行变性，使之打开折叠的空间结构。还原/变性蛋白上样缓冲液中含有的SDS 可断裂蛋白分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，同时 SDS 也与蛋白疏水区结合，由于 SDS 带大量的负电荷，因而消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异，使其均带有相同密度的负电荷。缓冲液中的强还原剂则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂，分子被解聚成组成它们的多肽链。 某些抗体识别的表位是非连续氨基酸构成的蛋白三维结构，此种情况则需要使用非变性蛋白样品进行电泳，抗体的说明书一般会标注。非变性电泳的样品和电泳缓冲液中均不加 SDS，蛋白样品也不需加热变性。有的抗体仅仅识别非还原形式的蛋白，如氧化形式(特别是半胱氨酸残基)的蛋白，此时还原剂也必须从上样冲液和电泳缓冲液中除去。 联科生物提供多种蛋白上样缓冲液，包括SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、非变性蛋白上样缓冲液、非变性非还原性蛋白上样缓冲液。这些缓冲液均以改良的溴酚蓝为染料，5倍浓缩，即用型，使用方便，操作简单，全部现货供应。 产品列表：
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